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多肽合成是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過(guò)程

更新時(shí)間:2022-02-23點(diǎn)擊次數(shù):1099
  多肽合成儀研究已經(jīng)走過(guò)了一百多年的光輝歷程。多肽合成是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過(guò)程,固相合成順序一般從C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。過(guò)去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法。多肽固相合成技術(shù)的發(fā)明同時(shí)促進(jìn)了肽合成的自動(dòng)化。
 
  多肽合成包括標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)多肽合成、多肽修飾、多肽文庫(kù)以及重組多肽表達(dá)。逐步固相多肽合成能合成5-50aa的多肽,對(duì)于大于200aa的多肽,通過(guò)片段濃縮及連接技術(shù)來(lái)合成。
 
  1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來(lái),經(jīng)過(guò)不斷的改進(jìn)和完善,到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù),表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法無(wú)法比的優(yōu)點(diǎn),從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。多肽合成總的來(lái)說(shuō)分成兩種:固相合成和液相多肽合成。
 
  多肽固相合成:
 
  固相多肽合成方法由于其合成方便,迅速,成為多肽合成的shou選方法,而且?guī)?lái)了多肽有機(jī)合成上的一次革命,并成為了一支獨(dú)立的學(xué)科——固相有機(jī)合成,固相合成的發(fā)明同時(shí)促進(jìn)了肽合成的自動(dòng)化。世界上diyi臺(tái)真正意義上的多肽合成儀出現(xiàn)在1980年代初期。
 
  多肽液相合成:
 
  基于將單個(gè)N-α保護(hù)氨基酸反復(fù)加到生長(zhǎng)的氨基成份上,合成一步步地進(jìn)行,通常從合成鏈的C端氨基酸開(kāi)始,接著的單個(gè)氨基酸的連接通過(guò)用DCC,混合炭酐,或N-carboxy酐方法實(shí)現(xiàn)。
 
  Carbodiimide方法包括用DCC做連接劑連接N-和C-保護(hù)氨基酸。重要的是,這種連接試劑促接N保護(hù)氨基酸自己炭基和C保護(hù)氨基酸自由氨基間的縮水,形成肽鏈,同時(shí)產(chǎn)出副產(chǎn)物。
 
  然而,此方法因其導(dǎo)致消旋的副反應(yīng),或在強(qiáng)堿存在時(shí)受到影響。慶幸地是,這些副反應(yīng)能Z小化,但是還不能*消除,方法是加入連接催化劑。
 
  此外,此方法也可用于合成N保護(hù)氨基酸的活性酯衍生物。依次產(chǎn)生的活性酯將自發(fā)與任何別的C保護(hù)氨基酸或肽反應(yīng)形成新的肽。
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