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溶解多肽是非常復雜的事情一起了解一下

更新時間:2021-04-12點擊次數:1690
  溶解多肽是非常復雜的事情,一般很難一下子確定合適的溶劑。通常是先取一點試驗,在沒有確定合適的溶劑前千萬不要全部溶解。
 
  下列方法有助于您選擇合適的溶劑:
 
  (1)判定多肽的電荷特定,設定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)和C端COOH為-1;堿性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2為+1,其它氨基酸的電荷為0。計算出將電荷數。
 
  (2)如果凈電荷數 >0,多肽為堿性,用水溶解:如果不溶解或溶解性不大,加入醋酸(10%以上);如果多肽還不能溶解,加入少量TFA(25ul)溶解,然后加入500ul水稀釋。
 
  (3)如果凈電荷數<0,多肽為酸性,用水溶解;如果不溶解或溶解性不大,加入氨水(25ul)溶解,然后加入500ul水稀釋。
 
  (4)如果凈電荷數=0,多肽為中性,一般需要用有機溶劑如乙腈,甲醇或異丙醇,DMSO等溶解。還有人建議需要尿素來溶解疏水性很大的多肽。
 
  多肽合成需要考慮多肽的長度,電荷,親疏水性等因素。長度越長,合成粗品的純度和產率都隨著降低,純化的難度和無法合成的幾率就會大些。
 
  當然多肽功能區的序列是無法改變的,但是為了多肽的順利合成,有時不得不在功能取的上下游增加一些輔助氨基酸,以改善多肽的溶解性和親疏水性。
 
  如果多肽太短,合成也可能有問題,主要問題是合成的多肽在后處理過程中有一定的難度,5肽以下的多肽,一般要有疏水的氨基酸,否則后處理難度加大。15個氨基酸殘基以下的多肽一般都可以得到滿意的產率和得率。
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